常规石蜡包埋是现今病理组织包埋的主要方式,也是目前进行病理学诊断的前提。石蜡组织切片进行HE 染色前需经烘烤,烤片温度高低及时间多少至关重要。易出现的问题主要有:染色脱片、脱蜡不足不着色、点状蜡岛(点状的未脱净蜡的组织成白色)、细胞焦缩等。
最佳烤片温度和时间:烘烤温度高低以及时间长短可能直接影响组织切片对载玻片的黏附性及 HE 染色的效果。
1.一般将烤片温度设定60~75℃,时间为20~30分钟。烤片温度越高,石蜡组织切片不发生脱落时间越短,为10~25分钟。
2.烤片温度设定为60℃以下、时间20分钟时,胃镜小标本组织切片大部分脱落,而肿瘤和淋巴组织切片很少脱落,这可能是胃镜小标本组织表面积小,黏附性也小引起的。
3.笔者认为,60℃烘烤切片,时间最好为25分钟。但组织切片放进烤片机后要达到所设定的温度 一般为10分钟左右,所以要打出预热的时间。
4. 烤片温度设定为90℃、30分钟的组织切片与60℃25分钟的组织切片HE染 色 效 果 一 致 , 但90℃过夜烘烤的组织整体染色效果差,特别是胞核染色淡。