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HE 染色切片经常出现部分区域颜色发灰的现象,如何应对?
 日期:2025/2/20 14:31:00 


常规石蜡切片苏木精伊红染色,镜检发现某些区域组织结构发灰,即细胞核内染色质及核仁显示不清,呈淡蓝色云雾状,该现象严重时影响病理诊断。可以采用以下处理方法:

1. 加热取下盖玻片。

2. 二甲苯彻底除去切片上的中性树胶。

3. 由高至低梯度乙醇洗去二甲苯,充分水洗。

4.切片放入0.25%高锰酸钾溶液中5分钟,水洗。

5.再入2%草酸溶液中2分钟,充分水洗。

6.入 Harris 苏木精染液15分钟,水洗。

7.常规分色反蓝,镜下观察细胞核内染色质及核仁至清晰为止。 

8.伊红染色,脱水、透明、封固。

9.石蜡切片发灰的组织结构,处理后大多能显示清晰的细胞核内染色质及核仁。 

10.苏木精伊红染色组织结构发灰的原因:

(1)一是石蜡切片的组织固定不及时,或组织块取材太厚,影响组织的固定、脱水、透明和浸蜡。

(2)二是由于在制片过程中人为造成组织片的干涸。0.01%氢氧化钠、0.5%氨水、饱和碳酸氢钠水溶液能将原切片苏木精、伊红染色完全脱净,本方法关键在于延长苏木精的染色时间,从常规切片在Harris苏木精染液中作用3~5分钟,延长至15分钟。其原理为:苏木精经氧化成熟变为氧化苏木精,并需在媒染剂的作用下才具有染色能力。未固定好的组织细胞核、细胞退变和人为造成干涸的细胞核与氧化苏木精结合能力差,如延长苏木精染液的染色时间,可加强两者结合力,使核内染色质及核仁较清晰的显示出来。该法的优点是方法简便、快速、效果好。