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液相色谱柱的应用
 日期:2021/8/25 9:44:11 
液相色谱柱的应用
我们在使用色谱柱之前,都户对色谱柱的功能进行测试,并且要把测试结果都保存下来,来作为今后评估色谱柱功能变化的一个参考。柱函数测试应根据色谱柱工厂报告中的条件(工厂试验中使用的条件为佳条件)进行,只要测量结果具有可比性。然而,应该注意的是,柱的功能可能会因样品、活性相、柱温度和其他使用条件的不同而有所不同。
1、样品的前处理
好运用活动相溶解样品。
预处理柱用于去除样品中的强极性或柱填料的不可逆吸附。采用0.45μm滤膜去除颗粒杂质。
2、活动相的制造
液相色谱是指样品组分在柱填料和活性相之间进行质量交换以达到分离的目的,因此活性相必须具有以下特性:
活性样品相对于样品具有一定的溶解性,这可以确保样品成分不会被存放在柱中(或在柱中保存很长时间)。
活性相和样品不发生化学反应。
为了获得良好的分离效果,活性相的粘度应尽可能小;降低塔的压降,延长泵的使用寿命(可采用递升温法降低活性相的粘度)。
活性相的物理化学性质应与所使用的检测器相适应。优选地使用低紫外吸收的溶剂来使用紫外检测器。
即活化相的沸点不能太低,否则容易产生气泡,不能进行试验。
在生产活动阶段后,必须对其进行脱气处理。去除活性相中溶解的微量气体不仅有利于检测,而且可以防止微量氧对样品的活性相的影响。
3、运动相速度的选择是柱内运动相线速度的函数,采用不同的流速可以得到不同的柱效应。对于特定的液相柱,为了找到的柱效,好采用佳的流速。对于内径为4.6mm的液相色谱柱,流速为1ml/min,内径为4.0mm时,流速为0.8mL/min。
当选用流速时,剖析时刻或许延伸。改变流动相洗涤强度的方法可以缩短分析时间(例如,在使用反相柱时,可以适当增加甲醇或乙腈的含量)。
试验前,活性水相的制备效果好,特别是在夏季使用缓冲溶液作为活性相时。
流动相要求使用0.45μm的滤膜来去除颗粒杂质。
运用HPLC级溶剂制造活动相,运用适宜的活动相可延伸液相色谱柱的运用寿数,进步柱功能。