实验概述
植物染色有多种染色方式,其操作流程和动物染色类似。番红O-固绿染色多用于软骨的染色,有时也可用于植物染色,木化、栓化和角质的细胞被番红染成鲜红色,纤维素的细胞壁被固绿染成绿色。固绿是一种酸性染料,可将纤维素的细胞壁和细胞质染成蓝绿色,该染液染色速度快,通常10-30s即可,不易褪色。
实验步骤
1.石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ8min-二甲苯Ⅱ8min-无水乙醇Ⅰ 6min-无水乙醇Ⅱ6min-95%酒精 6min-85%酒精 6min-75%酒精 5min-流水冲洗;
2.蒸馏水水洗2次,5min/次;
3.滴加番红染液染色45min左右,室温;
4.自来水水洗,洗去多余染料;
5.入90%酒精分化至组织附着的染料退去;
6.滴加固绿染液染色10-30s;
7.无水乙醇洗去多余染料,镜下观察番红与固绿着色情况;
8.入1:1二甲苯无水乙醇混合溶液2min,至载玻片透明;
9.入二甲苯Ⅰ5min,二甲苯Ⅱ5min,二甲苯Ⅲ5min;
10.中性树胶封片。
染色结果判读:木质化的细胞壁及核呈红色,薄壁细胞、细胞质呈绿色。
注意事项:固绿颜色着色程度不易把握,需严格控制。