1.组织固定：新鲜组织在固定液中固定 24h 以上。低温运输存放的新鲜直接切片的组织则跳过固定以及脱水的步骤，直接进行 OCT 包埋并切片。
2.脱水：将组织从固定液取出放于15%的蔗糖溶液内4℃冰箱脱水沉底后转入30%的蔗糖溶液内4℃冰箱脱水沉底。
3.OCT 包埋：将脱好水的组织取出用滤纸将表面水稍吸干后，用手术刀将目的部位组织修平整，切面朝上放于样本托上，组织周围滴上 OCT 包埋剂，将样本托放在冰冻切片机的速冻台上速冻包埋，OCT变白变硬后即可进行切片。
4.切片：将样本托固定于切片机上，先粗切将组织面修切平整后即可开始切片，切片厚度 8- 10μm，将干净的载玻片平放于切出的组织片上方即可将组织贴于载玻片上。片子写好标签后-20℃保存备用。
