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Von Kossa硝酸银法
 日期:2023/4/24 15:28:00 

简 介:

钙在人体内大量存在,构成骨骼作为支持人体的支架,在分泌、运送、肌肉收缩、神经传导等也起重要作用。许多染料可以于钙形成螯合物,包括茜素红S、红紫素、核固红等。茜素红S属一种蒽醌类衍生物,是茜素磺酸钠盐,它能与碳酸钙或磷酸钙中的钙盐螯合形成橙红色复合物。钙盐染色常用方法有硝酸银法和茜素红S法,钙盐染色试剂盒(Von Kossa硝酸银法)原理在于该法是一种金属置换法,硝酸银溶液作用于含有不溶性钙盐的切片时,钙被银所置换,银盐在光的作用下被还原为黑色金属银,适用于大量样本的钙盐组织染色。

操作步骤:

1、组织固定于10%中性福尔马林,常规脱水包埋。

2、切片厚度5μm,常规脱蜡至水。

3、蒸馏水洗1min。

4、切片入Von Kossa硝酸银溶液强光照射15-60min。

5、蒸馏水洗1min。

6、入海波溶液处理2min。

7、HE染色液或Van Gieson复染细胞核。

8、常规脱水透明,中性树胶封固。

阴性对照(可选):

取另外一张连续切片脱蜡至水,置于Von Kossa对照液处理20min,流水冲洗5min.与实验片一同入Von Kossa硝酸银溶液,其余步骤同上。

染色结果:

钙盐黑褐色至深黑色

细胞核根据复染液不同而不同

背景红色


注意事项:

1.钙盐组织固定以中性福尔马林为佳。

2.作用时间取决于阳光照射时光的强度和时间。

3.若暴露于紫外灯下,则应缩短照射时间,一般5-10min即可。

4.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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