免疫荧光双标是目前病理染色服务中运用较多的一种方法,下面为大家介绍免疫荧光双标的标记方法,希望对大家有所帮助。
(1)直接法双重免疫荧光标记:将标记有两种不同荧光素的抗体(如抗A和抗B)以适当比例混合,滴加在标本上孵育,然后洗去未结合的荧光抗体,在荧光显微镜下分别选择两种相应的激发滤片观察,即可对两种抗原进行定位和定量。直接法简便可靠,但灵敏度较低。
(2)间接法双重免疫荧光标记:用未标记的两种特异性第1抗体孵育组织或细胞,洗去多余的第1抗体后,再用两种不同的荧光素分别标记的第二抗体孵育组织或细胞,洗去多余的第二抗体,后在荧光显微镜下分别选择两种相应的激发滤片观察,从而对两种抗原进行定位和定量。使用此法应注意两种特异性第1抗体必须来源于不同种属,且荧光标记第二抗体的种属必须与第1抗体的种属相匹配。