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微小组织冰冻切片如何制作?
 日期:2025/10/16 15:34:00 


在实际工作中经常会有一些微小组织冰冻,微小组织体积一般为:1mmx1mmx1mm,针对微小组织的特殊性。冰冻制片应遵循如下方法:

1.切片的适宜温度:冰冻切片机应长期处于待机备用状态,冰冻台温度维持在-20~-25℃左右。不同的微小组织标本需要不同的切片温度。但微小组织由于体积小,温度不要太低,致组织变硬,不易切片。

(1)细胞较丰富组织,如肝、肾、淋巴结等,切片温度应在-18--19℃左右,冰冻时间不易过长,时间过长,组织易碎。组织变脆,可用手指在组织上摸一下再切或将组织拿出放置10秒左右。

(2)软组织、脂肪组织,切片温度应在-21--23℃左右,2~3μm,应迅速冰冻。(3)较硬或破碎组织,切片温度应在-19~-21℃左右。

(4)固定送检的冰冻组织要求新鲜,切忌放在生理盐水、乙醇或包入纱布中。取材时组织不能水洗,以免出现冰品。

2.固定液种类很多,采用的冰冻固定液以无水乙醇80ml+甲醛15ml+冰醋酸5ml。固定效果较好,染色细胞结构清晰。

3.调节防卷板和切片刀的角度,切片时进刀的速度应均匀平稳,速度过慢,切片增厚,容易脱片。

速度过快,组织易磕掉。一般将防卷板和切片刀的角度调节成5°,防卷板放置是否得当,直接影响切片能否展开。

4.贴片时要依靠载玻片的热量将组织吸附上来,贴片时载玻片与刀面的角度成30°~45°,切忌压片。

5.包埋剂常用有以下几种:①进口OCT 包埋剂;②羧甲基纤维素;③合成胶水;

取材时针对微小组织,在冰冻托上放置合成胶水,使微小组织埋在其中靠上位置,增大微小组织体积,保证切片时组织的完整性。使用效果与OCT相同,但价格低廉,不伤刀。

综上所述,用此方法制作微小组织冰冻切片,镜下:细胞核与细胞质染色对比分明,颜色鲜艳、透亮、组织变性程度较轻,并且简单快速、易作、经济实惠,效果满意。在制作微小组织冰冻切片时要在工作中不断摸索,总结工作经验。只有制作满意的冰冻切片,才能进一步提高冰冻病理诊断水平,为病理诊断提供可靠依据。