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WGA染色方法
 日期:2025/5/16 8:38:00 

麦胚凝集素(Wheat germ agglutinin,WGA)是一种 36kDa的凝集素,广泛应用于细胞生物学,可以特异性结合心肌细胞膜上的糖蛋白,将心肌细胞膜染出来。通过WGA染色,可以分析心肌细胞直径、面积等,来判断麦胚凝集素(Wheat germ agglutinin,WGA)是一种 36kDa的凝集素,广泛应用于细胞生物学,可以特异性结合心肌细胞膜上的糖蛋白,将心肌细胞膜染出来。通过WGA染色,可以分析心肌细胞直径、面积等,来判断心肌细胞是否肥大等病变情况.


实验步骤

1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ8min-二甲苯Ⅱ8min-无水乙醇Ⅰ 6min-无水乙醇Ⅱ 6min-95%酒精  6min-85%酒精 6min-75%酒精  5min-流水冲洗;

2.抗原修复:组织切片置于盛有柠檬酸(PH6.0)抗原修复液的高压锅内进行抗原修复,喷气计时2.5min, 自然冷却后将玻片置于 PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤 3 次,每次 5min;

3.加WGA染色液:组化笔画圈,防止液体扩散,加稀释好的WGA染色液,37℃孵育1h;

4.洗片:玻片置于 PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤 3 次,每次 8min;

5. DAPI染核:滴加 DAPI,室温孵育10min,之后玻片置于 PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤 3 次,每次 6min;

封片:抗荧光淬灭剂封片;

6.镜检拍照:切片于荧光显微镜下观察并采集图像。(DAPI紫外激发波长330-380nm,发射波长420nm,发蓝光;FITC激发波长465-495nm,发射波长515-555 nm,发绿光;)。

三、染色结果判读:DAPI染出来的细胞核在紫外的激发下为蓝色,WGA阳性表达为的绿色。