石蜡切片主要用于HE染色、免疫组化、特殊染色等。在取材后,常使用10%中性福尔马林固定液(主要成分为甲醛)进行固定,以保护组织结构和细胞形态,同时起到抗原保护和防腐作用。然而,由于甲醛对组织的渗透力相对较弱,固定标本时需要注意以下几点:
1.1 及时固定:为防止组织自溶,固定液应尽早加入。通常要求标本离体后的30分钟内进行固定,以确保固定效果的最佳。
1.2足够的固定液:固定液的体积应至少是组织体积的4-10倍,确保固定液能够充分渗透和覆盖组织样本。这样可以保证固定液与组织充分接触,提高固定效果。
1.3 切开大组织:对于较大的组织样本,应进行多切面切开,以便固定液能够更好地渗透和固定整个组织。这有助于避免组织内部未固定或固定不充分的问题。
1.4 特殊处理:对于特定的组织类型,根据研究需求,可能需要进行特殊处理。例如,肾脏通常要求进行矢状面切开;肠组织用于制作瑞士卷时,需要先剪开肠腔并卷成卷状,然后再进行固定;而含有骨质、钙化的组织还需要脱钙液进行脱钙。
1.5 合适的容器:固定后的组织样本会变得硬和定形,因此选择宽口、宽底的容器有助于方便将组织标本放入和取出,避免因容器口径过小而损坏固定后的组织。
1.6 适当的固定时间:固定时间通常在12小时到72小时之间较为合适。时间太短可能导致固定效果不佳,组织自溶的风险增加;而时间过长则可能影响后续的制片和染色效果,同时会降低抗原的活性。
1.7 储存条件:常温、阴凉、密封储存。